Im deutsch besetzten Frankreich wird Shosanna Dreyfus Zeugin der Hinrichtung ihrer Familie durch den Nazi-Oberst Hans Landa. Shosanna entkommt knapp und flieht nach Paris, wo sie sich eine neue Identität als Besitzerin und Betreiberin eines Kinos aufbaut. Anderswo in Europa organisiert Leutnant Aldo Raine eine Gruppe jüdischer Soldaten, um gezielte Vergeltungsaktionen durchzuführen. Raines Truppe, die bei ihren Feinden als "The Basterds" bekannt ist, schließt sich der deutschen Schauspielerin und Undercover-Agentin Bridget Von Hammersmark an, um die Anführer des Dritten Reichs auszuschalten. Unter einem Kinozelt laufen die Schicksale zusammen, und Shosanna ist drauf und dran, ihren eigenen Racheplan zu verwirklichen...